LeapWal 無血清細(xì)胞凍存液 PZ110R含多種保護(hù)劑成分，一些保護(hù)劑，易于穿透細(xì)胞，避免細(xì)胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細(xì)胞，同時另一些保護(hù)劑不能穿透細(xì)胞，但可以在冰晶形成之前，優(yōu)先結(jié)合細(xì)胞外的水分子，降低細(xì)胞外溶液的電解質(zhì)濃度，減少陽離子進(jìn)入細(xì)胞的數(shù)量，我公司無血清細(xì)胞凍存液，為多種保護(hù)劑組合，在細(xì)胞內(nèi)外進(jìn)行雙重保護(hù)，大大提高了細(xì)胞復(fù)蘇存活率。
LeapWal 無血清細(xì)胞凍存液 PZ110R細(xì)胞復(fù)蘇過程：
(1)提前開啟水浴鍋，溫度調(diào)節(jié)到37度。輕輕的晃動凍存管，注意管內(nèi)凍存細(xì)胞的融化情況。當(dāng)管內(nèi)的冰核還有黃豆大小的時候，取出來，用酒精棉擦拭管體，轉(zhuǎn)移到超凈工作臺內(nèi)。
注意：這一步對細(xì)胞存活率至關(guān)重要。既要盡快融化，以減少融化過程對細(xì)胞的損害；又要盡可能減少細(xì)胞在較高溫度停留的時間，以減少DMSO對細(xì)胞的毒害。切不可將凍存管放在水浴鍋內(nèi)不管。
(2)將凍存的細(xì)胞冷凍管從液氮中取出，迅速置于水浴鍋中融化，盡量1min融化，時間越短，對細(xì)胞影響越小。
(3)打開凍存管管蓋。輕柔的將凍存管內(nèi)的細(xì)胞懸液(約1mL)吸取出來，轉(zhuǎn)移到一個預(yù)冷的15mL離心管內(nèi)。緩慢加入10mL細(xì)胞培養(yǎng)基(4℃)，邊加邊輕搖混勻，滴加完之后蓋上管蓋，輕輕地上下顛倒混勻。將融化后的含細(xì)胞的冷凍保存液迅速析出置于新鮮培養(yǎng)基中充分混勻，(如細(xì)胞冷凍保存液為500ul，則加入到5ml新鮮培養(yǎng)基中，如細(xì)胞冷凍保存液位1ml，則加入10ml新鮮培養(yǎng)基中。)
(4)混勻后立即離心，800轉(zhuǎn)，3min即可，離心結(jié)束后棄上清，加入預(yù)溫的新鮮培養(yǎng)液。
(5)混勻后分瓶置于二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。(二氧化碳濃度根據(jù)培養(yǎng)基要求決定，通常為5%)。
